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P產(chǎn)品分類RODUCT CATEGORY
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描述:測(cè)定意義GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動(dòng)物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。測(cè)定原理GOD催化產(chǎn)生H2O2,過(guò)氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì),顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關(guān)系。葡萄糖氧化酶(GOD)檢測(cè)試劑盒
標(biāo)題:葡萄糖氧化酶(GOD)檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
葡萄糖氧化酶(GOD)檢測(cè)試劑盒
試驗(yàn)中所需的儀器和設(shè)備
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰、蒸餾水
試劑的組成和配制
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體10mL×1瓶,4℃保存;
試劑三:液體2mL×1支,4℃保存;
GOD工作液的配制:取24mL試劑一+5mL試劑二混勻,調(diào)PH至5.1(現(xiàn)配現(xiàn)用)。
樣品測(cè)定的準(zhǔn)備
組織處理:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
血清(漿):直接檢測(cè)。
測(cè)定步驟
試劑名稱(μL) | 測(cè)定管 |
GOD工作液 | 950 |
試劑三 | 30 |
混勻,37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴5min
樣本 | 30 |
將上述試劑按順序加入1 mL石英比色皿中,加樣本的同時(shí)開始計(jì)時(shí);在500 nm波長(zhǎng)下記錄20秒時(shí)的初始吸光度A1,比色后迅速將比色皿連同反應(yīng)液一起放入37℃(哺乳動(dòng)物)或25℃(其它物種)水浴中,準(zhǔn)確反應(yīng)1分鐘;迅速取出比色皿并擦干,500 nm下比色,記錄1分20秒時(shí)的吸光度A2。計(jì)算ΔA=A2-A1。
注意點(diǎn)
1、比色皿中反應(yīng)液的溫度必須保持37℃或25℃,取小燒杯一只裝入一定量的37℃或25℃蒸餾水,將此燒杯放入37℃或25℃水浴鍋中。在反應(yīng)過(guò)程中把比色皿連同反應(yīng)液放在此燒杯中。
3、不同勻漿組織中GOD活力不一樣,做正式試驗(yàn)之前請(qǐng)做1-2只預(yù)試,若A2-A1>1,
則說(shuō)明組織活力太高,必須用提取液稀釋成適當(dāng)濃度勻漿上清液,使A2-A1<1,
以提高檢測(cè)靈敏度。
4、兩個(gè)人同時(shí)做此實(shí)驗(yàn),一個(gè)人比色,一個(gè)人計(jì)時(shí),以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
5、此試劑盒僅適用于動(dòng)物組織和動(dòng)物血清(漿)。
葡萄糖氧化酶(GOD)檢測(cè)試劑盒
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