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描述:測定意義:POD(EC 1.11.1.7)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,可催化過氧化氫氧化酚類和胺類化合物,具有消除過氧化氫和酚類、胺類毒性的雙重作用。測定原理:POD催化H2O2氧化特定底物,在470nm有特征光吸收。過氧化物酶(POD)檢測試劑盒
標(biāo)題:過氧化物酶(POD)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
過氧化物酶(POD)檢測試劑盒
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水
試劑的組成:
提取液:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存;
試劑二:液體×2瓶,4℃保存;用時每瓶加入5mL試劑一,現(xiàn)配現(xiàn)用;
試劑三:液體10 mL×1瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備
收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每200萬細(xì)菌或細(xì)胞加入400μL提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進(jìn)行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
2、血清(漿)樣品:直接檢測。
測定步驟和加樣表:
試劑名稱(µL) | 測定孔 |
試劑一 | 520 |
試劑二 | 130 |
試劑三 | 135 |
蒸餾水 | 270 |
樣本 | 15 |
測定前將試劑一、二和三37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)放置10min。在1mL玻璃比色皿中按順序加入上述試劑,加入樣本后立即混勻并計時,記錄470nm下30s時的吸光值A1和1min30s后的吸光值A2。計算ΔA=A2-A1。
過氧化物酶(POD)檢測試劑盒
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