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描述:測定原理:H2O2與硫酸鈦生成黃色的過氧化鈦復(fù)合物,在415nm有特征吸收。過氧化氫(H2O2)檢測試劑盒
標(biāo)題:過氧化氫(H2O2)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
過氧化氫(H2O2)檢測試劑盒
測定意義:
H2O2是生物體內(nèi)常見的活性氧分子,主要由SOD和XOD等催化產(chǎn)生,由CAT和POD等催化降解。H2O2不僅是重要的活性氧之一,也是活性氧相互轉(zhuǎn)化的樞紐。一方面,H2O2可以直接或間接地氧化細(xì)胞內(nèi)核酸,蛋白質(zhì)等生物大分子,并使細(xì)胞膜遭受損害,從而加速細(xì)胞的衰老和解體;另一方面H2O2也是許多氧化應(yīng)急反應(yīng)中的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計、臺式離心機、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、丙酮60mL、濃鹽酸10mL、研缽和冰。
試劑的組成和配制:
試劑一:丙酮60mL×1瓶,4℃保存;(自備)
試劑二:粉劑×1瓶,4℃保存;臨用前加入10mL濃鹽酸充分溶解備用。用不完的試劑4℃保存;
試劑三:15mL×1瓶,4℃保存;
試劑四:60mL×1瓶,4℃保存;
H2O2提?。?/span>
1、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備
收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照每200萬細(xì)菌或細(xì)胞加入400μL試劑一,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。
稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一進(jìn)行冰浴勻漿;8000g 4℃離心10min,取全部上清液(注意吸取干凈),置冰上待測。
2、血清(漿)樣品
按照每100μL血清(漿)加入1mL試劑一的比例充分混勻。
注意事項:
1、由于試劑一易揮發(fā),試劑一必須先預(yù)冷再加,研磨時必須在冰上研磨。
2、本試劑盒中試劑的揮發(fā)性較高,請帶一次性手套和口罩。
測定步驟和加樣表(臨用前將試劑二、三和四37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴10min):
試劑名稱 | 測定管 | 對照管 |
樣本 | 吸取的量為全部上清液 |
|
試劑一 |
| 1000 |
試劑二 | 100 | 100 |
試劑三 | 200 | 200 |
4000g,常溫離心10min,棄上清,留沉淀
試劑四 | 1000 | 1000 |
加入試劑四溶解沉淀后,室溫靜置5min,倒入比色皿中,415nm處,對照管調(diào)零,記錄測定管吸光度。
過氧化氫(H2O2)檢測試劑盒
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