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P產(chǎn)品分類RODUCT CATEGORY
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描述:單體IgM在B細(xì)胞表面表達(dá)為膜結(jié)合抗體,在漿細(xì)胞分泌時(shí)表達(dá)為五聚體。由于它的高效價(jià),IgM比其他同種型更有效地結(jié)合抗原和重復(fù)表位(病毒顆粒和紅細(xì)胞),并且比IgG更有效地激活補(bǔ)體途徑。mu恒定區(qū)的基因包含四個(gè)由短插入序列分隔的結(jié)構(gòu)域。HRP標(biāo)記的兔抗人IgM
標(biāo)題:HRP標(biāo)記的兔抗人IgM
產(chǎn)品概述
HRP標(biāo)記的兔抗人IgM
重要提示:
本產(chǎn)品僅用于研究用途,不用于人類、治療或診斷應(yīng)用。
抗體來源 | Rabbit |
克隆類型 | Polyclonal |
交叉反應(yīng) | |
產(chǎn)品應(yīng)用 | WB=1:1000-10000 ELISA=1:1000-10000 IHC-P=1:100-1000 IHC-F=1:100-1000 not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. |
分 子 量 | 900kDa |
性 狀 | Lyophilized or Liquid |
濃 度 | 2mg/1ml |
免 疫 原 | Full length plasma protein: |
亞 型 | IgG |
純化方法 | affinity purified by Protein A |
儲(chǔ) 存 液 | 0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol. |
保存條件 | Storage: Store at –20 oC for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20oC. When reconstituted in sterile distilled water or diluent supplied, theantibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. |
HRP標(biāo)記的兔抗人IgM
一、戊二醛二步HRP標(biāo)記法
1. 原理
戊二醛為一種雙功能試劑,通過其醛基分別與酶和免疫球蛋白上的氨基共價(jià)結(jié)合,形成酶-戊二醛-免疫球蛋白結(jié)合物。
2. 標(biāo)記步驟
(1)稱取HRP25mg溶于1.25%戊二醛溶液中,于室溫靜置過夜。
(2)反應(yīng)后的酶溶液經(jīng)Sephadex G-25層析柱,用生理鹽水洗脫。流速控制在1ml/1分鐘,收集棕色流出液。如體積大于5ml,則以PEG濃縮至5ml。放置25ml小燒杯中,緩慢攪拌。
(3)將待標(biāo)記的抗體12.5mg用生理鹽水稀釋至5ml,攪拌下逐滴加入酶溶液中。
(4)用1M PH9.5碳酸緩沖液0.25ml,繼續(xù)攪拌3小時(shí)。
(5)加0.2M賴氨酸0.25ml,混勻后,置室溫2小時(shí)。
(6)在攪拌下逐滴加入等體積飽和硫酸銨,置4℃ 1小時(shí)。
(7)3000rpm離心半小時(shí),棄上清。沉淀物用半飽和硫酸銨洗二次,zui后沉淀物溶于少量0.15M PH7.4的PBS中。
(8)將上述溶液裝入透析袋中,對(duì)0.15M PH7.4的PBS緩沖鹽水透析,去除銨離子后(用萘氏試劑檢測),10,000rpm離心30分鐘去除沉淀,上清液即為酶結(jié)合物,分裝后,冰凍保存。
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