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描述:測定意義:AAT是一個多功能蛋白大家族,主要負(fù)責(zé)催化生物體內(nèi)各種?;腿ヵ;磻?yīng),在基因表達(dá)、代謝和信號傳導(dǎo)中具有重要作用。?;D(zhuǎn)移酶(AAT)檢測試劑盒
標(biāo)題:酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)檢測試劑盒
產(chǎn)品概述
?;D(zhuǎn)移酶(AAT)檢測試劑盒
測定原理:
AAT催化乙酰CoA轉(zhuǎn)移乙?;蕉〈迹瑫r還原DTNB生成TNB;TNB在412nm有吸收峰,測定412nm吸光度增加速率,來計(jì)算AAT活性。
自備儀器和用品:
研缽、冰、臺式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑一:液體100 mL×1瓶,4℃保存。
試劑二:液體25 mL×1瓶,4℃保存。
試劑三:粉劑×1管,-20℃保存。臨用前加蒸餾水1mL充分溶解,4℃保存。
試劑四:液體2 mL×1管,4℃保存。
試劑五:粉劑×1管,4℃避光保存。臨用前加入試劑二1mL充分溶解,4℃避光保存。
粗酶液提?。?/span>
稱取約0.1g樣品,加試劑一1mL,冰上充分研磨,16000g 4℃離心20min,取上清液待測。
AAT測定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長到412 nm,蒸餾水調(diào)零;水浴鍋35℃預(yù)熱。
2. 對照管:依次在500μL EP管中依次加入140μL試劑二、10μL試劑三、20μL試劑四和10μL試劑五,20μL待測液,室溫放置10min后于412nm測定吸光度,記為A1。
3. 測定管:依次在500μL EP管中依次加入140μL試劑二、10μL試劑三、20μL試劑四和20μL待測液,35℃水浴15min,加10μL試劑五,室溫放置10min后于412nm測定吸光度,記為A2。△A測=A2-A1。
酰基轉(zhuǎn)移酶(AAT)檢測試劑盒
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