土壤堿性蛋白酶檢測試劑盒

標題：土壤堿性蛋白酶檢測試劑盒

產品概述

土壤堿性蛋白酶檢測試劑盒

測定原理：

堿性環(huán)境中，S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成苯酚和磷酸氫二鈉，通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性。

需自備的儀器和用品：

可見分光光度計、臺式離心機、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，4℃避光保存。

試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。用前加50mL蒸餾水充分溶解。

試劑三：液體×1瓶，4℃保存。

試劑四：粉劑×1瓶，4℃避光保存。臨用前加1152μL無水乙醇（自備），48 μL蒸餾水充分溶解。（變褐色后不能再使用）

標準品：液體×1瓶，2 μmol/mL苯酚標準液，4℃保存。

催化反應：

稱取風干混勻土壤約0.1g，加入0.05mL甲苯（自備），輕搖15min；加0.4 mL試劑一并且搖勻后，置于37℃恒溫培養(yǎng)箱，開始計時，催化反應24h；到時后迅速加入1mL試劑二充分混勻，以終止酶催化的反應。10000rpm室溫離心10min，取上清液置于冰上待測。

顯色反應：

1. 分光光度計預熱30 min以上，調節(jié)波長到660 nm，蒸餾水調零。

2. 空白管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL蒸餾水，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A空白管。

3. 標準管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL標準液，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A標準管。

4. 測定管：取1mL玻璃比色皿，加入50 μL上清液，100 μL試劑三，20 μL試劑四，充分混勻，顯色后再加蒸餾水830 μL，混勻后室溫靜置30 min，于660 nm測定吸光度，記為A測定管。

土壤堿性蛋白酶檢測試劑盒