乙醇脫氫酶（ADH）檢測(cè)試劑盒

標(biāo)題：乙醇脫氫酶（ADH）檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)品概述

乙醇脫氫酶(ADH)檢測(cè)試劑盒

測(cè)定原理：

ADH催化NADH還原乙醛生成乙醇和NAD⁺，NADH在340nm處有吸收峰，而NAD⁺沒有；測(cè)定340nm 吸光度下降速率，來計(jì)算ADH活性。

自備儀器和用品：

研缽、冰、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器和蒸餾水。

試劑組成和配制：

試劑一：液體×1瓶，室溫保存。

試劑二：液體×1瓶，4℃保存。臨用前把試劑三轉(zhuǎn)移到試劑二中，4℃保存。                  

試劑三：粉劑×1瓶，－20℃保存。

試劑四：液體×1支，4℃保存。

粗酶液提取：

1、稱取約0.1g樣品，加試劑一1ml，冰上充分研磨，16000g 4℃離心20min，取上清待測(cè)。2、血清可以直接用于測(cè)定。

ADH測(cè)定操作：

1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到340 nm，蒸餾水調(diào)零。

2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min以上。

3. 空白管：在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL蒸餾水、160μL試劑二和20μL試劑四，迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A1和A2。△A空白管=A1-A2。空白管只需做1~2個(gè)。

4. 測(cè)定管：在微量石英比色皿/96孔板中依次加入20μL上清液、160μL試劑二和20μL試劑四，迅速混勻后于340nm測(cè)定吸光值變化，分別記錄15s和75s時(shí)吸光值，分別記為A3和A4。△A測(cè)定管=A3-A4。

乙醇脫氫酶(ADH)檢測(cè)試劑盒