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異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測試劑盒

描述:測定意義:
ICL(EC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物種子在萌發(fā)過程中,通過乙醛酸循環(huán)及其他過程將脂肪轉變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環(huán)的關鍵酶之一。
異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測試劑盒

  • 產品型號:
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2019-11-07
  • 訪問量:460
產品詳情/ PRODUCT DETAIL

標題:異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測試劑盒

產品概述

異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測試劑盒

測定原理:

ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和NADHLDH的作用下生成乙醇和NAD,NADH340nm下有特征吸收峰,監(jiān)測340nm吸光度的減小速率可間接反應ICL活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計/、臺式離心機、水浴鍋、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水

試劑組成和配制:

提取液:液體100mL×1瓶,4保存;

試劑一:液體15mL×1瓶,4保存;

試劑二:粉劑×1瓶,-20保存;

試劑三:液體×1支,4保存;

試劑四:粉劑×1瓶,4保存;臨用前每瓶加入4mL雙蒸水,充分混勻待用。用不完的試劑-20℃保存;

樣本的前處理:

1、細菌或細胞處理:收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照每500萬細菌或細胞加入1mL提取液,超聲波破碎細菌或細胞(功率20%,超聲3秒,間隔10秒,重復30次),15000g4℃,離心20分鐘,取上清,置冰上待測。

2、組織處理:稱取約0.1g組織,加入1mL提取液進行冰浴勻漿;15000g ,4,離心20分鐘,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

  1. 分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節(jié)波長至340nm,蒸餾水調零。
  2. 樣本測定

1)工作液的配置,將試劑二和試劑三轉移至試劑一中,充分混合溶解,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min;

2)在試劑四中加入4mL雙蒸水,充分溶解待用;

3)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本、150μL工作液和40μL試劑四,混勻,立即記錄340nm20s時的吸光值A1 2min20s后的吸光值A2,計算ΔA=A1-A2

異檸檬酸裂解酶(ICL)檢測試劑盒

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