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描述:測(cè)定原理:堿性條件下,蛋白質(zhì)中半胱氨酸、胱氨酸、色氨酸、酪氨酸以及肽鍵,能將Cu2+還原成Cu+;2分子的BCA與Cu+結(jié)合,生成紫色絡(luò)合物,在540-595nm有吸收峰,562nm處吸收峰較強(qiáng)。BCA蛋白法含量檢測(cè)試劑盒
標(biāo)題:BCA蛋白法含量檢測(cè)試劑盒
產(chǎn)品概述
BCA蛋白法含量檢測(cè)試劑盒
測(cè)定意義:
樣品可溶性蛋白質(zhì)含量常常用于酶活性計(jì)算。此外,可溶性蛋白質(zhì)含量也用于食品等質(zhì)量分析。
自備儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)/、微量石英比色皿/96孔板、移液器和蒸餾水。
試劑組成和配制:
試劑A:液體×1瓶,4℃保存。
試劑B:液體×1瓶,4℃保存。
標(biāo)準(zhǔn)蛋白:液體×1支,4℃保存。
工作液配制:臨用前把試劑B加入到試劑A瓶中,蓋緊后充分混勻。
樣品中可溶性蛋白質(zhì)提?。?/span>
液體樣品:澄清無(wú)色的液體樣品可以直接測(cè)定。
組織樣品:準(zhǔn)確稱(chēng)取約0.1 g樣品,加1mL提取液(自備,根據(jù)需要選用酶提取緩沖液或者蒸餾水或者生理鹽水),冰浴勻漿,10000rpm,4℃離心10min,取上清,即待測(cè)液。
測(cè)定操作:
1. 分光光度計(jì)預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到562 nm,蒸餾水調(diào)零。
2. 工作液置于60℃水浴預(yù)熱30 min以上。
3. 空白管:取0.5mL EP管,依次加入4μL蒸餾水和200μL預(yù)熱的工作液,混勻后置于60℃水浴保溫30min。用流動(dòng)自來(lái)水冷卻10 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,于562nm處測(cè)定,記錄吸光值A空白管。
4. 標(biāo)準(zhǔn)管:取0.5mL EP管,依次加入4μL標(biāo)準(zhǔn)品和200μL預(yù)熱的工作液,混勻后置于60℃水浴保溫30min。用流動(dòng)自來(lái)水冷卻10 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,于562nm處測(cè)定,記錄吸光值A標(biāo)準(zhǔn)管。
5. 測(cè)定管:取0.5mL EP管,依次加入4μL待測(cè)液和200μL預(yù)熱的工作液,混勻后置于60℃水浴保溫30min。用流動(dòng)自來(lái)水冷卻10 min,取200μL于微量玻璃比色皿/96孔板,于562nm處測(cè)定,記錄吸光值A測(cè)定管。
BCA蛋白法含量檢測(cè)試劑盒
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