甘油三酯(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP 雙試劑微板法)的計(jì)算公式

 甘油三酯(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP 雙試劑微板法)的計(jì)算公式

產(chǎn)品簡介：

甘油三酯(Triglyceride，TG)又稱三酰甘油，是 3 分子長鏈脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，是人體內(nèi)含量最多的脂類，大部分組織均可以利用甘油三酯分解產(chǎn)物供給能量，同時肝臟、脂肪等組織還可以進(jìn)行甘油三酯的合成，用酶學(xué)方法測定TG是生化檢測中的常用方法，其特點(diǎn)是：1、靈敏度、準(zhǔn)確度、精密度均高；2、使用溫和的反應(yīng)條件；3、操作簡便；4、適用于半自動生化分析儀。

甘油三酯(TG)檢測試劑盒(GPO-PAP 雙試劑微板法)又稱磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-過氧化物酶偶聯(lián)法等，其原理是甘油三酯被脂蛋白酯酶(LPL)水解為甘油和脂肪酸，甘油經(jīng)甘油激酶(GK)和三磷酸腺苷(ATP)磷酸化為 3-磷酸甘油(G-3-P)，后被磷酸甘油氧化酶(GPO)氧化并產(chǎn)生過氧化氫，再經(jīng)過氧化物酶(POD)、4-氨基安替比林(4-AAP)與酚(三者合稱 PAP)反應(yīng)，生成紅色苯醌亞胺(Trinder 反應(yīng))，苯醌亞胺的最大吸收在 510nm波長處，吸光度與樣本中甘油三酯含量呈正比，可通過酶標(biāo)儀在 500~520nm 處進(jìn)行比色測定。本試劑盒用于人或動物的血清、細(xì)胞、組織等樣本中的甘油三酯含量定量測定。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域，不宜用于臨床診斷或其他用途。 

操作步驟(僅供參考)：

1、樣本處理：

①血清、血漿、腦脊液樣本：從待測樣本中分離出的血清或血漿不應(yīng)有溶血，直接檢測，如超過線性范圍，用生理鹽水稀釋后檢測。

②細(xì)胞樣本：

a、取適量的細(xì)胞(一般推薦>106 以上)，1000g 離心 10min，棄上清，留取沉淀。

b、用 PBS 或生理鹽水清洗 1~2 次，1000g 離心 10min，棄上清，留取沉淀。

c、加入 200~300μl 的 PBS 或生理鹽水勻漿，冰浴條件下超聲破碎細(xì)胞，功率 300W， 每次 3~5s，間隔 30s，重復(fù) 3~5 次。亦可手動勻漿，制備好的勻漿液不可離心；亦可用 1~2% Triton X-100 冰浴 30~60min，制備好的裂解液不可離心。

③組織樣本：準(zhǔn)確稱取適量組織樣本，按質(zhì)量(g)：生理鹽水或 PBS(ml)=1：9 的比例，加入生理鹽水或 PBS，冰浴條件下手動或機(jī)械勻漿，2500~3000g 離心 10min，取上清待用。

2、配制 GPO-PAP 工作液：將緩沖液和酶試劑按 4:1 體積比混合均勻即成。

計(jì)算公式：

血清、血漿等液體樣本(空白調(diào)零)：

TG(mmol/L)=(待測管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×1.7mmol/L

細(xì)胞、組織等樣本(空白調(diào)零)：

TG(mmol/g)=(待測管吸光度/標(biāo)準(zhǔn)管吸光度)×1.7mmol/L÷待測樣本蛋白濃度(mg/ml)

參考區(qū)間：

健康成年人理想范圍：<1.7mmol/L(<150mg/dl)

邊緣升高：<1.7~2.25mmol/L(150~199mg/dl)

升高：<2.26~5.64mmol/L(200~499mg/dl)

很高：≥565mmol/L(≥500mg/dl)

注意事項(xiàng)：

1、 上述低溫試劑避免反復(fù)凍融，以免失效或效率下降。

2、 本法可直接用于檢測腦脊液中的 TG 含量，但不能直接檢測尿液中的 TG 含量，因?yàn)槲唇?jīng)處理的尿液中含有還原性物質(zhì)，影響過氧化物酶反應(yīng)。

3、 待測樣本如不能及時測定，應(yīng)置于 2~8℃保存，3 天內(nèi)穩(wěn)定。

4、 本法線性范圍可達(dá) 9.0mmol/L，如果樣本 TG 濃度過高，結(jié)果可能呈假性降低，應(yīng)用生理鹽水稀釋后重測，結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。

5、 工作試劑應(yīng)防止葡萄糖、膽固醇等試劑的污染。

6、 試劑易受空氣氧化而變紅，需做空白測定。

7、 為了您的安全和健康，請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

有效期：6 個月有效。4℃運(yùn)輸，-20℃保存。

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