血氨測(cè)試盒的測(cè)定原理
一、測(cè)定原理:
用蛋白沉淀劑沉淀血液蛋白并破壞酶活性,防止離體后產(chǎn)生游離氨,同時(shí)除去大部分干擾顯色物質(zhì)。用Berthelot 反應(yīng)使無(wú)蛋白濾液中氨顯色,與標(biāo)淮液比較測(cè)定血液氨含量。
二、試劑組成與配制:(50 管/48 樣)
試劑一:蛋白沉淀劑Ⅰ,60mL×1 瓶,2~8℃保存。
試劑二:蛋白沉淀劑Ⅱ,60mL×1 瓶,2~8℃保存。
試劑三:顯色劑Ⅰ,60mL×1 瓶,2~8℃保存。
試劑四:顯色劑Ⅱ,60mL×1 瓶,2~8℃保存。
試劑五:7mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)貯備液 1mL×1 支,2~8℃保存。350μmol/L 標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液配制:按 7mmol/L 標(biāo)準(zhǔn)貯備
液:標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液=1:19 的比例 20 倍稀釋后備用。
試劑六:標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 20mL×1 瓶,2~8℃保存。
三、操作表:
五、測(cè)定意義:
血循環(huán)中的氨僅有 10.7-35.7umo1/L(15-50uq/dL 以氮計(jì)祘),氨主要來(lái)自腸道及細(xì)菌酶的氨基酸脫氨反應(yīng)。
骨骼肌運(yùn)動(dòng)時(shí)的代謝也產(chǎn)生少量氨。正常情況下氨在肝臟轉(zhuǎn)變成尿素。嚴(yán)重肝臟疾病,肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞功能受損
害,氨不能從循環(huán)中清除,引起血氨濃度升高。
高血氨有神經(jīng)毒性。往往伴隨肝性惱病(肝昏迷)。同時(shí)高血氨引起 a-酮戊二酸的消耗。影響腦脊液的檸
檬酸循環(huán),并改變神經(jīng)介質(zhì)的功能。
六、注意事項(xiàng):
1、蛋白沉淀劑Ⅰ、Ⅱ不可以混合后應(yīng)用;顯色劑Ⅰ、Ⅱ不可以混合后應(yīng)用。
2、如果您的樣本量少,可以按比例減少試劑用量。
3、加沉淀劑后不能長(zhǎng)時(shí)間放置,在 2 小時(shí)內(nèi)一定要取上清顯色,上清隨著時(shí)間延長(zhǎng)會(huì)逐漸呈現(xiàn)淡黃色霧狀,
不需要其他處理,加入顯色劑就會(huì)澄清。
七、實(shí)驗(yàn)相關(guān)性能指標(biāo):
血氨測(cè)試盒的測(cè)定原理