ATP含量檢測(cè)試劑盒使用手冊(cè)

ATP含量檢測(cè)試劑盒使用手冊(cè)

ATP 廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，是生物能量通貨，能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要

參數(shù)。測(cè)定ATP 含量并且計(jì)算能荷，能夠反映能量代謝狀態(tài)。

HK 催化葡萄糖和ATP 合成6-磷酸葡萄糖，6-磷酸葡萄糖脫氫酶進(jìn)一步催化6-磷酸葡萄糖脫氫生成NADPH，

NADPH 在340nm 有特征吸收峰，NADPH 和ATP 含量成正比，以此反應(yīng)ATP 含量。

溶液的配制：

1．提取液低溫條件下，可能有結(jié)晶析出，放于60℃水浴加熱溶解即可，不影響使用。

2．試劑二：臨用前加入7 mL 蒸餾水充分溶解，可加熱促進(jìn)溶解；

3．試劑四：臨用前取1 支加入0.2mL 蒸餾水溶解，用不完的試劑-20℃分裝保存2 周，避免反復(fù)凍融；

4．試劑五：臨用前加入3.2 mL 蒸餾水充分溶解，用不完的試劑-20℃分裝保存4 周，避免反復(fù)凍融；

5．試劑六：臨用前取1 支加入0.25 mL 蒸餾水備用，用不完的試劑-20℃分裝保存2 周，避免反復(fù)凍融；

6．標(biāo)準(zhǔn)品：5 mg ATP。臨用前加入0.826 mL 蒸餾水配成10 μmol/mL 的ATP 標(biāo)準(zhǔn)溶液，用不完的試劑-20℃

分裝保存4 周，避免反復(fù)凍融；

7．工作液的配制：臨用前請(qǐng)按試劑二(mL)：試劑三(mL)：試劑四(mL)：試劑五(mL)：試劑六(mL)=1：1：0.1：0.4：

0.1 的比例配制（2.6mL，約10T 的量），現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意事項(xiàng)：

1、加入提取液離心后的上清若為渾濁為正常現(xiàn)象。

2、如果吸光值大于1.1，建議將樣本用提取液稀釋后進(jìn)行測(cè)定。注意計(jì)算公式中乘以稀釋倍數(shù)；如果吸光值過低

或接近空白，建議加大樣本量后進(jìn)行測(cè)定，注意同步修改計(jì)算公式。

實(shí)