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線粒體膜電位檢測試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)
JC-1 是一種廣泛用于檢測線粒體膜電位△Ψm 的理想熒光探針。可以檢測細(xì)胞、組織或純化的線粒體膜電位。在線粒體膜電位較高時,JC-1 聚集在線粒體的基質(zhì)中,形成聚合物,可以產(chǎn)生紅色熒光;在線粒體膜電位較低時,JC-1 不能聚集在線粒體的基質(zhì)中,此時JC-1 為單體,可以產(chǎn)生綠色熒光。這樣就可以非常方便地通過熒光顏色的轉(zhuǎn)變來檢測線粒體膜電位的變化。常用紅綠熒光的相對比例來衡量線粒體去極化的比例。
線粒體膜電位的下降是細(xì)胞凋亡早期的一個標(biāo)志性事件。通過JC-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變可以
很容易地檢測到細(xì)胞膜電位的下降,同時也可以用JC-1 從紅色熒光到綠色熒光的轉(zhuǎn)變作為細(xì)胞凋亡早期的一個檢測指標(biāo)。
JC-1 單體的大激發(fā)波長為515nm,大發(fā)射波長為529nm;JC-1 聚合物的大激發(fā)波長為585nm,大發(fā)射波長為590nm。實際觀察時,使用常規(guī)的觀察紅色熒光和綠色熒光的設(shè)置即可。
本試劑盒提供了CCCP 作為誘導(dǎo)線粒體膜電位下降的陽性對照。對于六孔板中的樣品,本試劑盒共可以檢測100 個樣品;對于12 孔中的樣品,本試劑盒共可以檢測200 個樣品。
注意事項:
(1)JC-1 (200×)在 4 ℃、冰浴等較低溫度情況下會凝固而粘在離心管管底、管壁或管蓋內(nèi),可以 20~
25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用。
(2)必須先把 JC-1(200×)用試劑盒提供的超純水充分溶解混勻后,才可以加入 JC-1 染色緩沖液(5×)。
不可先配制 JC-1 染色緩沖液(1×)再加入 JC-1(200×),這樣 JC-1 會很難充分溶解,會嚴(yán)重影響后續(xù)的
檢測。
(3)裝載完 JC-1 后用 JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌時,使 JC-1 染色緩沖液(1×)保持 4 ℃左右,此時的
洗滌效果較好。
(4)JC-1 探針裝載完并洗滌后盡量在 30 分鐘內(nèi)完成后續(xù)檢測。在檢測前需冰浴保存。
(5)請勿把 JC-1 染色緩沖液(5×)全部配制成 JC-1 染色緩沖液(1×),本試劑盒使用過程中需直接使用
JC-1 染色緩沖液(5×)。
(6)如果發(fā)現(xiàn) JC-1 染色緩沖液(5×)中有沉淀,必須全部溶解后才能使用,為促進(jìn)溶解可以在 37℃加熱。
(7)CCCP 為線粒體電子傳遞鏈抑制劑,有毒,請注意小心防護(hù)。
(8)為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
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