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了解液相色譜中常見的故障
一、泵壓不穩(wěn)
1、泵頭中有氣泡。
解決方法:將流動相用超聲波清洗器進(jìn)行脫氣;打開排液閥,按PURGE功能鍵排除氣泡;打開排液閥,用注射器從泵的排液管中抽液排除氣泡。
2、單向閥堵塞,污染,磨損造成單向閥工作不正常。
清洗單向閥或者更換。參見在線清洗或超聲波清洗單向閥操作步驟。
3、吸濾頭堵塞。
超聲波清洗吸濾頭或更換。
4、柱塞密封墊漏液。
檢查泵頭是否漏液,如果漏液需更換柱塞密封墊。
操作如下:柱塞密封墊磨損時密封性減弱,就會發(fā)生漏液,密封墊漏液會產(chǎn)生以下現(xiàn)象:泵頭后面的清洗管路有流動相流出,如果連接泵頭自動清洗裝置時,裝清洗液的瓶內(nèi)清洗液會增加,此時需要更換新的柱塞密封墊。
二、泵壓力偏高
1、泵的管路過濾器堵塞。
斷開泵的出口管路,以1mL/min送液如果壓力高于0.3MP,說明管路過濾器堵塞。管路過濾器位于泵的出口處,用于清除由泵輸送的流動相試劑中的機械雜質(zhì)或柱塞密封墊磨損的碎屑。使用或使用含機械雜質(zhì)較多的流動相時容易引起堵塞,此時需要清洗或更換過濾器上的過濾片。
操作如下:擰松并取下過濾器連接管路,擰松并取下管路過濾器,用鑷子將管路過濾器放入裝有異丙醇的燒杯中,用超聲波清洗15分鐘,清洗完畢后用鑷子取出過濾器,用手將過濾器擰入連接口,用手?jǐn)Q緊,用扳手?jǐn)Q緊60°-90°即可,打開泵電源開關(guān),用純水做流動相,以1mL/min送液,如壓力值超過0.3MP,應(yīng)更換新的管路過濾片。用鑷子將過濾器前端的過濾片取下,把新的過濾片用純水或異丙醇浸濕,放在過濾器座上,用手將過濾器擰入連接口,用手?jǐn)Q緊并用扳手?jǐn)Q緊60°~90°即可,連接上泵出口管路,更換完畢。
2、預(yù)混合室過濾片堵塞。
斷開混合室出口管路,以1mL/min送液壓力高于1MP,說明預(yù)混合室過濾片堵塞。當(dāng)混合室壓力過高時,可能是由于混合室的過濾片污染所造成。
解決方法:用扳手?jǐn)Q開預(yù)混合室的管路,用扳手取下預(yù)混合室,取出過濾片,取下的過濾片放在裝有5﹪稀硝酸溶液的燒杯中,用超聲波清洗15分鐘,再用純水清洗5分鐘,將清洗后的濾片安裝到預(yù)混合室中,擰緊預(yù)混合室,裝好連接管路,清洗完畢。如果管路壓力依然偏高需要更換過濾片。
3、進(jìn)樣器堵塞。
斷開進(jìn)樣器出口,以1mL/min送液壓力高于1MP, 說明進(jìn)樣器流路堵塞,建議使用清洗液洗進(jìn)樣器流路。
4、色譜柱堵塞或污染。
斷開色譜柱出口,送液壓力仍高,說明色譜柱堵塞或污染,建議按色譜柱使用說明書清洗或者更換色譜柱。
5、檢測池堵塞。
斷開檢測池出口,送液壓力仍高,說明檢測池堵塞。
紫外檢測器和二極管陣列檢測器的清洗:
打開并取下檢測器前面板,擰下檢測器出口和入口管路接頭,斷開連接,再擰松兩個連接頭的固定螺絲,拔掉檢測池加熱-線,擰松檢測池固定螺絲,取下檢測池,將適配器連接到檢測池的入口并擰緊螺絲,用注射器吸取50mL異丙醇緩緩地把溶劑推入檢測池中,清洗完畢后拆下適配器,觀察檢測池中是否留有異物,如果清洗不*,應(yīng)分解清洗檢測池,用螺絲刀擰下檢測池一側(cè)的透鏡固定螺絲,用鑷子取下透鏡和墊片,注意鑷子不要劃傷透鏡表面,用螺絲刀擰下檢測池另一側(cè)的透鏡固定螺絲,用鑷子取下透鏡和墊片,將透鏡放入裝有異丙醇的燒杯中,用超聲波清洗10分鐘。
同時觀察檢測池內(nèi)是否還有異物,如有異物,先將保溫罩拆下,將檢測池朝下放入裝有異丙醇的100毫升燒杯中,注意液面剛好沒過檢測池孔即可,不宜使用過大燒杯,以致溶劑接觸到加熱-線,用超聲波清洗10分鐘,清洗完畢后,取出檢測池和透鏡放在濾紙上,將池體表面的液體擦干,裝回保溫罩,將新的墊片裝入檢測池左側(cè)池孔中,再將凸透鏡放在墊片上面,注意墊片和透鏡應(yīng)放在檢測池的凹槽中,透鏡的凸面應(yīng)朝上,擰上透鏡固定螺絲,將新的墊片放入檢測池右側(cè)池孔中,將平面透鏡放在墊片上面,擰上透鏡固定螺絲,螺絲的緊固程度應(yīng)該以檢測池不漏液為準(zhǔn),過緊可能會損壞透鏡,將檢測池裝到檢測器上,檢測池上的箭頭方向應(yīng)朝上,擰緊固定螺絲,將連接頭固定在檢測器上,插入檢測池加熱-線,分別連接好檢測池的入口和出口連接管路,裝上前面板,檢測池清洗完畢。
三、泵不送液
1、泵頭中有氣泡。
解決方法:將流動相用超聲波清洗器進(jìn)行脫氣;打開排液閥,按PURGE功能鍵排除氣泡;打開排液閥,用注射器從泵的排液管中抽液排除氣泡。
2、單向閥堵塞,污染,磨損造成單向閥工作不正常。
解決方法: 對于雙泵頭串聯(lián)泵,在主泵頭和輔泵頭的下端分別裝有入口單向閥,當(dāng)送液泵出現(xiàn)壓力波動超過0.3MP或者送液壓力達(dá)不到正常壓力值時,排除氣泡干擾的因素后,初步判斷單向閥被污染導(dǎo)致上述現(xiàn)象發(fā)生,可用下面兩種方法清洗。
第-一種方法是在線清洗:打開儀器電源,確認(rèn)鍵盤在開啟狀態(tài),拆下泵的出口管,連接阻尼管,阻尼管的出口直接接入廢液瓶,將流動相換成異丙醇,打開排液閥,按PURGE鍵更換流動相,等待其運行結(jié)束后關(guān)閉排液閥,按FUNC鍵將流速設(shè)為1mL/min,按PUMP鍵送液清洗,需要清洗一個小時以上。
第二種方法是超聲波清洗:擰松并取下單向閥的管路用扳手分別松開兩個泵頭的入口單向閥,用手取下單向閥,用鑷子將單向閥放入裝有異丙醇的燒杯中,用超聲波清洗15分鐘,清洗完畢后將單向閥用鑷子取出,裝到泵頭上,用扳手?jǐn)Q緊,將單向閥連接管路裝好并擰緊,重新送液測試,如果壓力正常則清洗完畢,如果故障依然存在,可能需要更換單向閥。
3、吸濾頭堵塞。
解決方法:吸濾頭清洗或者更換。清洗時將吸濾頭從送液管中拔出,用鑷子放入裝有異丙醇的燒杯中,超聲波清洗15分鐘,清洗完畢后將吸濾頭用鑷子取出,用濾紙擦干后插入送液管,放入裝有流動相的瓶中,送液測試,確認(rèn)吸濾頭沒有氣泡產(chǎn)生,否則應(yīng)更換新的吸濾頭。
四、基線漂移
1、色譜柱污染。用洗脫力強的溶劑長時間清洗色譜柱或更換色譜柱。
2、管路污染。用清洗液清洗流路或更換被污染的部件。
3、流動相污染或純度不夠。流動相重新配置,凈化處理或更換純度高的流動相。
4、檢測池污染。清洗檢測池,參見檢測池清洗操作步驟。
5、環(huán)境溫度變化大。
6、泵壓力不穩(wěn)。參見泵壓不穩(wěn)故障診斷。
五、基線噪音
1、檢測池有氣泡。參見檢測池清洗操作步驟。
2、流動相純度不夠,或流動相在使用波長下吸收大。更換純度高的流動相或更換流動相種類。
3、檢測池能量低。更換光源或光路部件。
4、儀器接地不良。重新連接地線,確定接地。
六、峰面積重現(xiàn)性
1、自動進(jìn)樣器清洗液流路有氣泡。
選擇合適的清洗液并脫氣,使用PURGE功能沖洗進(jìn)樣閥,排除氣泡。
2、自動進(jìn)樣器進(jìn)樣口漏液。
在流路中進(jìn)樣口發(fā)生漏液時,通常是進(jìn)樣口密封墊損壞造成,這時需要更換進(jìn)樣口密封墊。
3、自動進(jìn)樣器流路污染。
使用清洗液清洗進(jìn)樣器管路。
4、色譜柱污染或劣化。
用洗脫力強的溶劑長時間清洗色譜柱或更換色譜柱。
七、峰形異常
1、色譜柱污染或劣化。用洗脫力強的溶劑長時間清洗色譜柱或更換色譜柱。
2、流路污染。使用清洗液清洗流路。
3、流路死體積大。檢查管路連接處,正確連接管路,消除死體積。
八、保留時間重現(xiàn)性
1、泵壓力不穩(wěn)。參見泵的故障診斷。
2、環(huán)境溫度變化大。
3、色譜柱未充分平衡好。充分平衡色譜柱。
4、梯度洗脫時流動相混合比例異常。確認(rèn)各流路的流速是否正確。
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