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糖原含量試劑盒說(shuō)明書(shū) 微量法

更新時(shí)間:2024-08-09      瀏覽次數(shù):139

產(chǎn)品名稱(chēng):糖原含量試劑盒說(shuō)明書(shū)

規(guī)格:微量法, 100 管/96 樣


正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

測(cè)定意義:

糖原是由葡萄糖單位構(gòu)成的高分子多糖,是糖的主要的儲(chǔ)存形式之一,主要貯存在肝和肌肉中作為備用能量,分別稱(chēng)為肝糖原和肌糖原。肝糖原可調(diào)節(jié)血糖濃度,當(dāng)血糖升高時(shí)可在肝臟合成糖原,血糖降低時(shí),肝糖原則分解為葡萄糖以補(bǔ)充血糖。因此,肝糖原對(duì)維持血糖的相對(duì)平衡十分重要。肌糖原是肌肉中糖的儲(chǔ)存形式,在劇烈運(yùn)動(dòng)消耗大量血糖時(shí),肌糖原不能直接分解成血糖,必須先分解產(chǎn)生乳酸,隨血液循環(huán)到肝臟,通過(guò)糖異生轉(zhuǎn)變?yōu)楦翁窃蚱咸烟恰?/span>

測(cè)定原理:

蒽酮法。利用強(qiáng)堿性提取液提取糖原,在強(qiáng)酸性條件下利用蔥酮顯色劑測(cè)定糖原含量。

需自備的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、濃-硫-酸(不允許快遞)和蒸餾水。

糖原提取:

1、細(xì)胞或細(xì)菌:收集 500~1000 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;加入 0.75mL 提取液超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(功率 20%或 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);轉(zhuǎn)移至10mL 試管中,95℃水浴 20min(蓋緊,防止水分散失),隔5min 振搖試管1次,使充分混勻:取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到 5ml,混勻,8000g25℃離心10min,取上清液待測(cè)。

2、組織:稱(chēng)取 0.1~0.2g 樣品,加入 0.75m 提取液充分勻漿;轉(zhuǎn)移至 10ml 試管中;95℃水浴 20min(蓋緊,防止水分散失),隔 5min 振搖試管1次,使充分混勻;待組織全部溶解后,取出試管冷卻后,用蒸餾水定容到 5ml,混勻,8000g25℃離心 10min,取上清液待測(cè)。


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