HEPES緩沖鹽溶液的使用注意事項(xiàng)

【產(chǎn)品名稱】 ：HEPES緩沖鹽溶液

【產(chǎn)品規(guī)格】 ：100ml                  

【儲(chǔ)存條件】 ：-20℃保存                

【有效期】 ：1年

【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】 ：

HEPES緩沖鹽溶液(2×HeBS)是一種常用的細(xì)胞轉(zhuǎn)染溶液，主要由HEPES、氯化鈉、磷酸鹽等組成，其最適pH值為7.05～7.12，經(jīng)過濾除菌處理；影響磷酸鈣轉(zhuǎn)染效率的因素主要有沉淀中DNA含量、DNA在細(xì)胞上停留的時(shí)間、休克時(shí)間；2×HeBS要求DNA濃度在10～50μg為宜，Hela、BALB等細(xì)胞沉淀放置16h，CHO、DUKX、BⅡ等細(xì)胞可以通過甘油、DMSO進(jìn)行熱休克處理以提高轉(zhuǎn)染效率。

HEPES 即 4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-I-ethanesulfonicacid，中文名稱N-(2輕乙基)呱湊- N'-2 磺酸，分子式為 C8H18N04S，分量為 238.31，HEPES 是一種非離子兩性緩沖劑。

本產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其它用途！

【主要成分】 ：

主要由HEPES.氯化鈉、磷酸鹽、去離子水等組成,經(jīng)過濾除菌。

【注意事項(xiàng)】 ：

1、注意無菌操作 ,盡量避免污染。

2、加入2xHeBS(pH7.05) 500ul到上述含有DNA的500μl溶液后,應(yīng)在1～2min內(nèi)加入到細(xì)胞中,時(shí)間間隔不宜過久,以免影響轉(zhuǎn)染效果。

3、轉(zhuǎn)染 12～24h后,可以加入終濃度為10mmol/L的J酸鈉溶液,可以提高病毒滴度。

4、收集病毒. 上清時(shí),可以每隔12h收集-次,但同時(shí)應(yīng)補(bǔ)足培養(yǎng)液。這種情況下,病毒滴度沒有明顯下降。

5、 4℃ 500g離心5min收集上清目的在于去除活細(xì)胞。

6、該試劑用于轉(zhuǎn)染時(shí),應(yīng)檢測(cè)其轉(zhuǎn)染效率,好的轉(zhuǎn)染效率應(yīng)介于30～60%之間。

7、為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一-次性手套操作。